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技術文章首頁 > 技術文章 >詳細解說Agilent 1260液相色譜儀操作流程及注意事項
詳細解說Agilent 1260液相色譜儀操作流程及注意事項
點擊次數:1633 更新時間:2018-01-04

  詳細解說Agilent 1260液相色譜儀操作流程及注意事項

  1、配制流動相,水相置于棕色玻璃瓶中,有機相置于相應無色玻璃瓶中。水相和有機相必須過濾,濾膜選用0.45有機系濾膜(尼龍)。注意:過夜的流動相必須重新過濾。

  2、流動相過濾后,置超聲儀中超聲20min。

  3、將已超聲的流動相輕輕換上,動作不要太劇烈,會產生氣泡,注意不要把有機相和水相換反了(A是有機相,B是水相)。

  4、將色譜柱接上,注意:流動相的流動方向必須和色譜柱上的箭頭方向一致。

  5、打開計算機電源、顯示器開關,并輸入密碼。

  6、依次從上往下打開液相色譜儀上的所有開關。

  7、打開液相色譜在線工作站(online),輸入密碼。

  8、打開的液相工作站上分為四個小部分,依次為進樣器、泵、柱溫箱及檢測器。在第二個部分設置流動相的體積及溶劑瓶的總體積。

  9、脫氣:旋開purge閥開關,右擊泵部分,選擇“method”,選擇B相100%,流速1ml/min,選擇確定;右擊泵部分,選擇“control”,選擇pump “on”,10秒后,調節流速為3ml/min,10秒后,調節流速5ml/min,開始水相脫氣3min,水相脫氣結束后,將流速按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的流程往下調。然后開始有機相脫氣,步驟同上,注意流速不可一下子從1ml/min調到5ml/min,需慢慢調節。流動相脫氣結束后,旋緊purge閥開關。

  10、建立樣品的色譜方法:設置進樣體積,選擇洗針進樣,注明洗針位置;設置流動相比例、流速及梯度洗脫條件,序列進樣時設置樣品運行時間和后運行時間;打開柱溫箱,設置柱溫;打開紫外檢測燈,設置檢測波長。全部設置好后,保存方法,不要覆蓋別人的方法。

  11、譜圖保存路徑的設置:View—preferences—data path(第二個選項)—remove舊的文件夾,add自己的文件夾。再打開Sequence—Sequence parameter—選擇Data path為自己的文件夾即可。

  12、設置進樣序列,注意序列表的填寫。序列進樣后,如想關閉泵及檢測器,請點擊Sequence—Sequence parameter選擇shutdown—standby。

  13、將樣品按順序擺放在自動進樣器的托盤上。

  14、注意泵壓力是否正常,色譜柱是否漏液,如一切正常,關上柱溫箱的蓋子。待基線平穩后,點擊Sequence進樣。

  15、進樣結束后,需沖洗色譜柱,色譜柱很脆弱,需用心保護。

  16、液相用完后,請關閉液相色譜在線工作站,依次關閉液相色譜儀上的開關,zui后關閉計算機。

  17、將自己的色譜柱換下時,需用連接管代替色譜柱連在液相上,不可以讓其暴露在空氣中。

  18、從計算機中拷取譜圖必須使用CD/DVD盤刻錄,不可直接使用U盤。

  19、請大家共同維護液相色譜儀,每次做完液相,請收拾液相臺面,注意臺面的整潔,并注意廢液瓶,及時倒出廢液。

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